產(chǎn)品簡介：
產(chǎn)品名稱：脫氫酶(DHA)試劑盒品牌
規(guī)格：48樣 96樣
貨號：AS026
檢測方法：可見分光光度法 微板法
產(chǎn)品分類：氧化應(yīng)激系列
貯存溫度：2～8℃。
本試劑盒保質(zhì)期：6個(gè)月。本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本：
取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。
【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本：
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；
12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10
4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。
Metallothionein 金屬硫抗體 規(guī)格: 0.2mlKir6.2 ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Integrin alpha 4/CD49d 整合α4抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-GSK-3 Beta(Thr390) 磷化合成激3β抗體 規(guī)格: 0.1ml
stabilin1/STAB 1 淋管內(nèi)皮細(xì)胞和管內(nèi)皮細(xì)胞受體1抗體 規(guī)格: 0.2mlhnRNP L 異質(zhì)核糖核L抗體 規(guī)格: 0.2ml
EMAP2 內(nèi)皮單核細(xì)胞激活肽2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗貂IgG 規(guī)格: 0.1mlTRPM5 瞬時(shí)受體電位離子通道5抗體（M亞家族） 規(guī)格: 0.2ml
phospho-IKK beta(S474) 磷化KB抑制激β抗體 規(guī)格: 0.1ml
ZNF268 鋅指脂抗體 規(guī)格: 0.1mlUBE2D1 泛連接D1抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-NFATc2(Ser330) 磷化核因子活化T細(xì)胞胞漿2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Trk B/NTRK2 激B抗體 規(guī)格: 0.1ml
KCNK9/KCNK3 敏感鉀離子通道3抗體 規(guī)格: 0.1ml
脫氫酶(DHA)試劑盒品牌130-61-0利嗪 規(guī)格： 50mg
3738-70-3 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg
82373-94-2二乙烯 規(guī)格： 20mg
6902-91-6馬; 大根香葉 規(guī)格： HPLC≥99%,20mg/支
152-95-4槐角;Sophoricoside 規(guī)格： 20mg
土貝母甲 規(guī)格： 20mg
33069-62-4;Paclitaxel 規(guī)格： 20mg
14216-03-6常春藤C 規(guī)格： 10Mg
念珠菌顯色對照培養(yǎng)基 規(guī)格： 4.8g/100ml
11054-24-3麥冬皂A;Ophiopogonin A 規(guī)格： 10mg
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。
